【用途】 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株反转录聚合酶链反应 (RT-PCR)检测试剂盒,用于检测猪血清和组织 中的PRRSV变异株,适用于 PRRSV变异株的检测、诊断 和流行病学调查。
【原理】 提取样品 RNA,在反转录酶的作用下,以 RNA 为模板,以引物为起点合成与RNA模板互 补的cDNA链。在TaqDNA聚合酶的作用下,经 高温变性、低温退火、中温延伸的循环,使特异 DNA 片段的拷贝数放大一倍。经过35次循环, 最终使扩增 DNA 片段放大了数百万倍。将扩增 DNA片段进行电泳,经染色后,在紫外灯照射下, 肉眼可见到DNA片段的扩增带。
【试剂盒组成】 详见说明书
【需要自备的器材】
1.试剂:核酸提取试剂、琼脂糖、电泳试剂等。
2.仪器:分析天平、离心机、PCR扩增仪、电泳 仪、电泳槽、紫外凝胶成像仪(或紫外分析仪)、 微波炉、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、 200 µL、1000 µL)。
3.耗材:称量纸、20 mL一次性注射器、500 mL 量筒、500 mL锥形瓶、经焦碳酸二乙酯(DEPC) 水处理的灭菌1.5mL离心管和吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
【使用注意事项】详见说明书
【样品采集】 病死或扑杀的猪,取肺、扁桃体和脑等组织; 待检活猪,用注射器取血5 mL。2~8 ℃保存,送 实验室检测。(要求送检病料新鲜,严禁反复冻融 病料。)
【RT-PCR操作】 详见说明书
【规格】50份/盒
【保存及有效期】0.2 mL薄壁PCR管可存放于室 温,其他试剂于-20℃以下保存,有效期为 12 个 月。