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发布日期:2025/3/11 17:15:00

电泳仪的工作原理

 

在溶液中能吸附带电质点或本身带有可解离基团的物质颗粒,如蛋白质、氨基酸等,在一定的pH值条件下,于直流电场中必然会受到电性相反的电极吸引而发生移动。

不同物质的颗粒在电场中的移动速度除与其带电状态和电场强度有关外,还与颗粒的大小、形状和介质黏度有关。

根据这一特征,应用电泳法便可以对不同物质进行定性或定量分析,或将一定混合物进行组分分析或单个组分提取制备,电泳仪正是基于上述原理设计制造的。

 

电泳仪的分类

 

(1)全自动荧光/可见光双系统电泳仪

具有荧光/可见光双系统,使用荧光试剂项目如CK、LD同工酶。优点灵敏度、准确度高且采用高压、低温系统,速度非常快。

 

(2)全自动醋纤膜电泳仪

可见光单系统,使用醋纤膜电泳片,优点为自动化程度更高。多用于临床常规血清蛋白电泳分析。

 

(3)全自动琼脂糖电泳仪

可见光单系统,使用琼脂糖凝胶电泳胶片,优点为灵敏度高,可用于低浓度蛋白检验,如尿蛋白及脑脊液蛋白,同工酶的分离效果也相当不错,所能做项目较多且灵敏度较高。

 

(4)全自动电泳分析系统

该电泳仪集中了上述仪器的优点,自动点样、电泳、呈色、烘干。可用各种电泳片,包括琼脂片、醋酸片、聚丙烯酰胺等,采用可见光及荧光呈色双系统,是一种较理想的电泳仪。

 

电泳仪的使用方法

 

1、首先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输出端联接,注意极性不要接反。

2、电泳仪电源开关调至关的位置,电压旋钮转到最小,根据工作需要选择稳压稳流方式及电压电流范围。

3、接通电源,缓缓旋转电压调节钮直到达到的所需电压为止,设定电泳终止时间,此时电泳即开始进行。

4、工作完毕后,应将各旋钮、开关旋至零位或关闭状态,并拨出电泳插头。

 

如何选购电泳仪

 

1、要根据实验要求选择相应规格型号的电泳仪,才能确保经济、耐用、简单、合理。

2、目前市面上的电泳仪电源,按电压分为高压1500~5000V、中压500~1500V、低压500V三种。

3、从电压的角度来看,用于核酸(琼脂糖)水平电泳、PCR电泳、DNA回收、印迹转移等实验只需最高电压300V。

4、输出的所有参数根据其型号的不同都有一个特定的工作范围,如果实际需要超过这一范围,就应当选择能够满足使用的另外型号的电泳仪电源。

5、用户如果需要一台电泳仪电源带几个电泳槽工作时,首先要确定总电流不要超过仪器的最大范围。

 

电泳仪的注意事项

 

1、电泳仪通电进入工作状态后,禁止人体接触电极、电泳物及其它可能带电部分,也不能到电泳槽内取放东西,如需要应先断电,以免触电。同时要求仪器必须有良好接地端,以防漏电。

2、仪器通电后,不要临时增加或拨除输出导线插头,以防短路现象发生,虽然仪器内部附设有保险丝,但短路现象仍有可能导致仪器损坏。

3、由于不同介质支持物的电阻值不同,电泳时所通过的电流量也不同,其泳动速度及泳至终点所需时间也不同,故不同介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。

4、在总电流不超过仪器额定电流时,可以多槽关联使用,但要注意不能超载,否则容易影响仪器寿命。

5、某些特殊情况下需检查仪器电泳输入情况时,允许在稳压状态下空载开机,但在稳流状态下必须先接好负载再开机,否则电压表指针将大幅度跳动,容易造成不必要的人为机器损坏。

6、使用过程中发现异常现象,如较大噪音、放电或异常气味,须立即切断电源,进行检修,以免发生意外事故。

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